SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学(xué )和(hé )分子生物学实验中常用的蛋白质分离和鉴定技术,这项技术(shù(👑) )的基本(běn )原理是(shì )利(lì )用蛋白质(zhì )在电场中的迁移率与其分(fèn )子(📵)量成反比的关系,通过添加阴离子洗涤剂(jì )SDS(十二烷(wán )基硫(liú )酸(💷)钠(🕡))使蛋白质带上负电(diàn )荷,从而消除(✊)了蛋白质原有的电荷差异,使得蛋白质(🚋)的迁移仅(jǐn )受其大小的影(yǐng )响。
操作步骤(📵)方面,首先需要(yào )制备(bèi )适(😊)当浓度和pH值(zhí )的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含有(yǒu )SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔(kǒng )中,通电后,蛋白质开始根(🐅)据大小(xiǎo )分离,小(👓)分子蛋白质(🕙)移动得(dé )更快,而(🚽)大分(fèn )子蛋白(bái )质则较慢,通过染色或西(xī )方(fāng )印迹等方法可以检测和分析蛋(dàn )白质。
应(🍵)用范围(wéi )广泛,SDS-PAGE不仅用(yòng )于蛋白质分子量的测定,还广泛(fàn )应(yīng )用于(🦆)蛋白质纯化程度(dù )的分析、蛋白质变性和复性研究以及蛋白质(🕉)-蛋(dà(🦓)n )白质相互作用的研究,它也是研究蛋白质翻译后修饰的重要工具(🚟)。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分析(👱)工具,但它也有(yǒu )局限性,对于(yú )极端大小(xiǎo )的蛋白质,分辨率(lǜ )可能会降低;某些蛋白质(😑)可能(🍿)因为(wéi )结构的特(🌌)殊性而在凝(níng )胶中的迁移不符合预期,在进行(háng )SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分子生物学(xué )技术以获得(⏭)(dé )更准确(🔴)的结果(🍅)。
视频本站于2024-11-06 11:11:07收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。