SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶(jiāo )电泳,是生物化学和分子生物学(🔢)实验中常(cháng )用的蛋白质分离和鉴定技术,这项技术(🏉)的(✉)基本(běn )原理是(shì )利用(yò(🛫)ng )蛋白质在电场中的迁移率与其(qí )分子量成(🤩)反比的关系,通(🏸)过添(❄)加阴离(lí )子洗涤剂SDS(十二烷(wán )基(🤡)硫酸钠)使(shǐ )蛋白质带上负电荷,从而消除(chú )了蛋白质原有(🔀)的电荷差异,使得(dé )蛋白质的迁移仅受其大(dà )小的影响。
操作步骤方面,首先需要(yào )制(🚞)备适当浓(nóng )度和pH值(💳)的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含(🎠)有SDS和还原剂的蛋白质(🚵)样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根(gēn )据大(dà )小分离,小分子(zǐ )蛋白(🆘)质移动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色或(🎲)西方(fāng )印(😽)(yìn )迹等方法(🛢)(fǎ )可以检(jiǎn )测和分(♑)析蛋(dàn )白质。
应用(yòng )范(🍐)围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的(de )测定,还广泛应用(yòng )于(yú )蛋白质纯化程度的分析、蛋白质变性和复性研究以(yǐ(🎒) )及蛋(dàn )白质-蛋白质相互(🔈)作用的研究,它也是研究(jiū )蛋(dàn )白质翻译后修(xiū )饰的重(chóng )要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大(dà )的分析工具,但它(tā )也有局限性,对于极端大小(xiǎo )的蛋白质(zhì ),分辨(biàn )率(lǜ )可能(🛀)会降低;某些蛋白质可能因为结构的特殊性(xìng )而在凝胶(🎞)中的迁移不(🌜)符合预期(qī ),在(zài )进行SDS-PAGE分析时(🤤),通常需要结合其他生化和分子生(shēng )物学技术以获(🚚)得更准确的结果(😤)。
视频本站于2024-11-01 07:11:33收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。